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代謝酶誘導(dǎo)作用研究

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通過酶誘導(dǎo)試驗(yàn)從酶活性或mRNA表達(dá)水平評(píng)價(jià)供試品是否對(duì)肝臟藥物代謝CYP450亞酶或UGT酶有潛在的誘導(dǎo)作用,了解其潛在的DDI風(fēng)險(xiǎn),為PBPK建模提供參數(shù)和后續(xù)臨床合并用藥提供參考。

孵育體系             

貼壁原代肝細(xì)胞                                                                                                              

種屬

測(cè)試酶系

CYP450CYP1A2、2B6、2C8、2C9、2C193A等

供試品測(cè)試濃度

1-6個(gè),根據(jù)客戶的藥效和毒性數(shù)據(jù)設(shè)計(jì)

細(xì)胞密度

0.7×106 cells/mL

孵育時(shí)間

2-4(可根據(jù)不同要求調(diào)整)

分析方法

LC-MS/MS

酶標(biāo)儀

RT-PCR

評(píng)價(jià)指標(biāo)

酶活性

mRNA

數(shù)據(jù)呈現(xiàn)

相對(duì)活性(% of VC)

相對(duì)陽(yáng)性對(duì)照活性(%)

相對(duì)于陽(yáng)性對(duì)照組的mRNA增加比例(% of PC)

體外半數(shù)最大誘導(dǎo)效應(yīng)的濃度EC50

體外最大誘導(dǎo)效應(yīng)Emax


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